大家好,今天、小编来为大家解答试管婴儿在试管里怎么生长这个问题,试管婴儿怎么培养胚胎很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
一、试管婴儿怎么培养胚胎
试管婴儿怎么培养胚胎,不孕不育并不可怕,试管婴儿是许多不孕夫妇的最后选择,试管婴儿需要通过检查排卵、取卵取精。试管婴儿的好处还有很多。以下分享试管婴儿怎么培养胚胎。
胚胎培养是指人类配子以及接受体外受精治疗的胚胎培养,卵子和精子结合后,会把受精卵放在装有营养液的培养皿里,培养3-6天,让他从一个细胞分裂多个细胞,最后发育成胚胎或囊胚。
医生获得卵子后会争分夺秒的把卵子送入实验室,一般取卵手术室和实验室是相连的,最大程度缩短卵子在体外暴露的时间。培养师拿到卵子后第一时间做处理,拨开卵子周围的颗粒膜细胞,展现卵子真正的面容。
培养师会对卵子进行评级:成熟卵、未成熟卵、变异卵。只有成熟的卵是可用卵。一般超促排的方法获得成熟卵能够达到80%的概率,就是属于正常情况。
卵子准备的同时,另一边会看精子情况。培养师会先进行观察,如果蝌蚪们一个个生龙活虎,那我们就不用为之后的结合而操心。主要通过多精子自由和卵子结合,或通过单精子注射结合,形成受精卵,再让发育成胚胎。
精子和卵子完成结合后,会把受精卵放在装有营养液的培养皿里,让他从一个细胞分裂多个细胞。
第一天:从1个细胞分裂成2个细胞
第四天:胚胎往往就挤在一起成为了一个大球,这个叫融合状胚胎
由于自月经周期的长短因人而异,同一患者不同周期也存在差异,所以不易安排取卵时间,而且自然周期中只有一个优势卵泡发育,受精后只能形成一个胚胎,而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。
所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能,以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的,提供多个胚胎移植,并尽可能使黄体发育与子宫内膜功能同步。
控制性超排卵一般是先用GnRHa使体内FSH和LH降调,再施与HMG或FSH排卵药物,刺激卵巢中的卵泡成长,依据患者对药物的反应性调整药物使用剂量,患者的年龄及药物的使用剂量不同,所获得的卵子数亦不同。
为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间,须利用阴道B超来监测卵泡大小,并配合抽血检查E2值(雌激素),调整用药量。当二至三个以上的卵泡直径大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当,便可注射人绒毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟。在注射hCG后34-36小时取卵。
最常用的取卵方式是在的局部麻醉下,经阴道B超引导,将取卵针穿过阴道穹窿,直达卵巢吸取卵子,并立即在显微镜下将卵子移到含胚胎培养液的培养皿中,置37°C的培养箱中培养。
精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净双手,用【自】慰法留取精液。所给的小杯是无菌的,留取时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。
取卵后4-5小时将处理后的精子与卵子放在同一个培养皿中,共同培养18小时后,可在显微镜下观察受精情况。若精子质量太差,无法自然受精,则必须以显微注射法强迫受精(参考卵细胞浆内单精子显微授精)。
受精卵在体外培养48-72小时可发育到8-16细胞期胚胎。此时依据患者的年龄、曾经怀孕与否及胚胎的质量,决定移植胚胎的数目,多余的胚胎可冷冻保存。
胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2-3天移植胚胎,我所采用的是受精后3-5天胚胎移植。推迟胚胎移植的时间,对体外培养的条件要求就越高,但推迟移植时间更符合妊娠生理,同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
目前我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。如果确定妊娠,则改用hCG继续补充到怀孕10周。
胚胎移植后14天,可由验尿或抽血确定是否妊娠。
1、卵子的质量精子的质量。实验室的环境。胚胎师的专业度。
2、而且培养的囊胚本来也不是一件容易的`事,对实验室的要求很高,实验室的氧气量,温度的变化都会影响最后的结果。而且精子和卵子的质量不好的话,胚胎也容易停止生长。
3、卵泡个数少,胚胎质量一般的建议不要养囊,养囊对胚胎质量要求比较高,一般胚胎移植是在取卵后第三天进行,这个时候的胚胎含有5~8个细胞,而囊胚是指胚胎在体外培育5~6天,达到数百个细胞,这个时候植入女方子宫就叫做囊胚移植。
养囊也叫囊胚培养,是“囊胚是胚胎体外培养”的终末阶段,它通常形成于卵子受精后的第5-7天。自然状态下,人类胚胎以囊胚的形式植入母体。进行囊胚移植,能获得较高的胚胎植入率。因此,进行囊胚培养、囊胚移植,始终是医患双方都感兴趣的一个选择。
胚胎培养实验室更是精密仪器成堆的神秘场所,是人类科技的巅峰体现之一。但实际上,自然状态下,母体提供了胚胎免光照、恒温、恒气体分压(最符合胚胎需要的二氧化碳、氧、氮分压)、最合理配比的营养物质及至关重要的必要细胞因子(并且所有这些物质保持动态更新、不存在代谢废物过度堆积)等条件。这些条件在实验室里,不是仅能粗略模拟,就是完全做不到。
二、试管婴儿的基本步骤
1、试管婴儿的步骤因患者的具体情况而有一些差异。它可以是简单的体外受精和胚胎移植,也可能是体外受精加上其他的辅助生殖技术,如显微授精、辅助孵化、外科方法取精、卵子的体外成熟、卵子/精子/胚胎冷冻、胚胎着床前诊断等。先介绍简单的体外受精和胚胎移植技术,它是试管婴儿技术的基础。
2、试管婴儿的基本步骤是:让女性产生数个卵子,将卵子从卵巢内取出,精子从男性取出,在试管婴儿实验室里使精子和卵子受精,受精后的卵子体外培养以便选择好的胚胎用来移植,将胚胎移植到患者的子宫,胚胎移植后的妊娠支持,胚胎移植后的妊娠检查,妊娠后的胎儿数日检查及胚胎着床部位的确定等。
3、女性患者的卵子产生在临床上叫做控制性超排卵处理,需要10~15天的时间。
4、什么是超排卵处理?为何要进行超排卵处理呢?
5、下文从自然排卵谈起。妇女的自然排卵周期中一般只有1个(有时也有1个以上)的优势卵泡发育,这个优势卵泡内的卵子成熟、排卵,受精后只能形成1个胚胎(单胎)。如果有两个卵成熟、排卵,受精后就会形成两个胚胎(异卵双胞胎)。如果有1个卵成熟、排卵,受精后形成1个胚胎,但这个胚胎在着床前分裂成两部分,也会形成两个胚胎(同卵双胞胎)。
6、由此可见,一般自然排卵也就是1个。而用这1个卵来进行体外受精的话,最多只能生产1个胚胎。在胚胎移植时就没有选择的余地。移植1个胚胎的妊娠率是很低的。有时,这个卵可能不被受精或不发育,就没有机会怀孕。所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能,以达到不受自然周期的限制,获得多个健康卵子的目的,这样在实验室里可以培养出更多的胚胎,从中选择高质量的胚胎移植,就能增加怀孕的机会。
7、控制性超排卵一般是先用一种叫GnRHA(促性腺激素释放激素激动剂,具体是达菲林和达必佳)的激素药物,它能阻止体内促卵泡激素和促黄体激素的分泌,这样外源性的激素就更能发挥作用。再用卵泡生长的激素刺激卵巢中的卵泡成长。为了使卵巢内的多个卵泡同时发育,一般患者是在月经期的第2-3天开始用促卵泡激素,这时的卵巢内一般没有大的卵泡。
8、依据患者对药物的反应调整药物使用剂量和使用时间,患者的年龄和对药物的反应不同,用药的剂量和用药时间也不同。待卵泡长到一定程度,卵泡内的卵子长到能够成熟的大小,再给予促卵子成熟的激素。等卵子基木成熟,但还没有排卵之前,通过手术方法把它们取出来。
9、对于大多数患者,需持续用药10天左右,有些可能短到8天,而长者可达15~16天。药物的种类和剂量取决于病人的'具体情况(细节请读排卵药物和排卵处理章节)。
10、在一些治疗周期中,应用药物后排卵可能会自动发生。当自动排卵发生时,卵子可能在盆腔中丢失,这个周期为此必须取消。有些患者可能在用药几天后,卵巢仍然没有反应,即无任何卵泡生长.对于这种情况,医生也会取消这一治疗周期。
11、 2.卵子诱导成熟(取卵前35~36小时)
12、上述用药大多数情况下只能使卵子长大,但是还不能获得成熟卵。为了评价卵泡内的卵子是否具有成熟能力,医生必须用超声仪来监测卵泡的大小,并配合检查血液的雌激素水平。当2或3个以上的卵泡直径大于1。8~2厘米,雌激素水平与卵泡数量相符时,这时的卵子就具有成熟的能力了。医生便可注射人绒毛促性腺激素促使卵泡内卵子成熟。人卵子的成熟时间大约是36-40小时,注射人绒毛促性腺激素后必须在35~36小时内取出。因此,医生会安排患者的取卵时间。由于取卵手术一般是在上午进行,所以注射人绒毛促性腺激素的时间一般在前两天的下午到晚上进行。
13、取卵是在注射了人绒毛促性腺激素的35~36小时内进行。过早或过迟取卵都会影响卵的取出率和取出卵的质量。过早可能会使卵子未能完全成熟,有较多的未成熟卵,而过迟有可能使一些大卵泡排卵,因而取不到卵。
14、取卵是一个小手术,可以是在全身麻醉下或是在局部麻巢下进行。经阴道超声仪引导,将取卵针穿过阴道,直达卵巢吸取卵子后,实验室人员立即在显微镜下将吸到的卵子移到含有胚胎培养液的培养皿中,置于37℃的培养箱中培养。由于阴道内超声波吸入术是一种小手术,有些医生为了让患者节约费用只使用止痛药而不使用全身麻醉。
15、一般取卵时间在30分钟之内。患者取卵后只有轻微的疼痛和极少量的出血,休息1~2个小时就可以回家,不会影响日常工作和生活。由于卵泡大小不一,因此取出的卵子的成熟阶段并不完全一致。有的可能是未成熟的,而有的可能是过成熟的。刚取出的卵周围被卵丘细胞所包围,一般可以通过这些细胞的扩张程度判断出卵子的成熟情况。但是,要知道它们的准确成熟阶段,必须将这些细胞与卵子分开。一般说来,可发现有以下几种卵子:
16、 1)成熟卵透明带下的卵周隙内有一个小的细胞,叫做第一极体,它是由卵子释放的。第一极体的释放是卵子成熟的指标。
17、 2)未成熟卵有两种不同时期的未成熟卵。一种是在透明带下的卵周隙内没有第一极体,但卵子内有一个明显的核,叫做生发泡,这种卵叫做生发泡期卵,这是最早期的未成熟卵。另一种是卵子的卵周隙内没有第一极体,卵子内也没有一个明显的核,这是处于生发泡期卵和成熟卵之间的未成熟卵。未成熟卵是不能用于受精的,必须等到它们完全成熟后才能用来受精。
18、 3)过成熟卵卵子成熟后必须受精。从卵子成熟到受精之间的时间一般是5~6个小时。如果在这个时间段内未能受精,卵子将会开始老化,最后死亡。由于卵子取出的时候卵泡大小不一,卵子的成熟阶段也就不可能在同一个时期。如果用时间过长,或卵子在受精前的体外时间过长都会使卵子过成熟。虽然过成熟卵能够被受精,但是由它产生的胚胎质量将会很差,胚胎移植后很难怀孕。
19、 4)异常卵有些卵从体积上看要比正常卵大许多,卵周隙内有两个第一极体,这样的卵的染色体是异常的,通常有两套染色体,因此是不能用来受精的。有的卵可能在成熟的某一阶段细胞内有异常的形态,如空泡、质地变黑等,这些都是卵子质量不好的标志。
20、用于体外受精的精子可以是新鲜采集的jing液,也可以是冷冻保存的jing液或者是从睾丸、附睾内抽取的精子。
21、如果是新鲜jing液,采集应与取卵同时进行。实验室工作人员或护士会告诉病人注意事项和采集方法,并提供无菌的jing液采集小杯。jing液采集后,需马上送到实验室,实验室工作人员接照实验室方法处理jing液,包括将液化的jing液在加入洗涤液后离心,将精浆除去,再用上游法或密度梯度离心法将活动的精子分离出来。
22、如果是睾丸或附睾内抽取精子,丈夫需要做一个小手术来取得精子。如果是冷冻精子或供精(大多数是冷冻精子),精子应该在取卵前储藏在实验室,不需男性患者当天去门诊。
23、授精本身是一个非常简单的过程。如果要做常规的体外受精,取卵后4~5小时将处理后的精子在计算确定好数量后与卵子放在同一个培养皿中,共同培养14~18小时左右,然后在显微镜下观察受精情况。精子数量必须确定,精子过多或过少都会影响卵子受精的结果。精子过多将导致多精子受精卵的产生,而精子过少将不能使卵子受精。若精子质量太差,就无法做常规的体外受精,如睾丸、附睾内抽取的精子,则必须以显微注射的方法授精(详见显微授精)。
24、 6.受精检查(胚胎的第1天)受精14-18小时后,必须检查卵子的受精情况。将那些受精的卵子(这时候应该叫受精卵)挑选出来在胚胎培养液中继续培养。用来受精的卵子并不一定会全部成功受精,有的可能没有受精,而有的可能是异常受精。受精卵的判断有以下几个标准:
25、 1)未受精卵精子没有进入卵子,卵子的状态与受精前完全一样。这些卵子可能会出现一些过成熟的表现,有时很难从卵子的形态上来判断。如果重新授精,这些卵子也有受精的可能,但来源于这种卵的受精卵,胚胎的发育不是很好,如果移植这样的胚胎怀孕的机会是非常小的。
26、 2)正常受精卵一个精子穿入卵子,并将卵子激活,卵子释放出第二极体。因而卵周隙内可以看到两个极体,卵子的分裂到此为止。卵子内这时形成两个核,称为原核,其中一个来源于卵子(雌原核),而另一个来源于精子(雄原核)。这是正常受精卵,不过这时候应当称之为胚胎。受精卵内的遗传物有一半来自卵子,另一半来自精子。准确地讲,一个真正的生命就此开始了。
27、 3)多精受精卵如果有两个或者两个以上的精子进入卵子,卵子也能够被激活,并释放出第二极体,并形成一个来自于卵子的原核,但是每一个进入卵子的精子也能形成一个来自于精子的原核。因此,这时候的卵子内部有三个或三个以上的核。这种受精卵叫做多精受精卵。胚胎的染色体将来就不是 23对,而是多于23对。大多数情况下多精受精卵不能正常发育和着床。多精受精卵的胚胎必须废弃,不能用来移植。
28、多精受精卵出现有两个方面的原因:一个是卵子方面。在正常情况下,卵子成熟后.它会产生一种多精受精阻止机制,它包括卵子的膜下出现的一些含有酶的颗粒(叫做皮质颗粒)和卵子周围的透明带。当第一个精子进入卵子的时候,这些皮质颗粒的膜与卵细胞膜融合.将酶释放到卵周隙。细胞膜的变化快速地阻止了正在进入的其他精子。与此同时,皮质颗粒释放的酶将对透明带的蛋白质起作用,改变透明带的性质,使其他精子不能继续进入透明带,这样一来就达到了阻止多精受精的目的。如果卵子的成熟有问题或透明带异常,都会导致多精受精。这种情况在临床上较为少见,如果有,可以用显微受精的方法来避免。另一个是精子方面。正常受精时,一个卵子的周围不是只有一个精子,而是有数以千计的精子,这样才能保证有一个精子进入。如果卵子周围精子过少,卵子就不能被受精,而精子过多,将会导致多精受精。这时候几个精子同时进入卵子,卵子无法在短时间内阻止它们。多精受精的程度和多精受精的比例与受精时的精子浓度成正比。因此,常规的体外受精时的精子浓度必须计算准确,以减少多精受精。
29、 4)孤雌激活卵孤雌激活卵是指卵子内只有一个来自卵子的原核,而没有来自精子的原核,也就是说只有一个核。它的出现情况比较复杂。可能是精子没有进入,卵子被自发激活,这就是纯粹的孤雌激活。也可能是精子进入了卵子并将卵子激活,但是精子的核没有变成原核。这种卵也有分裂的情况,但胚胎不能着床或发育成胎儿,因此也必须废弃。
30、受精检查必须在受精后20小时内进行。20小时后,由子两个原核的核膜融合,并将开始胚胎的分裂.就无法判定是否受精。
31、一般说来,体外受精的正常受精率在70%~90%之间。有的患者的卵子可能全部受精,而有些患者的卵子可能没有一个受精。
32、 7.胚胎体外培养(胚胎的第1~6天)
33、正常受精卵必须放到提前准备好了的胚胎培养液内培养。培养的当天(第1天),胚胎应该分裂l次,成为2细胞;第2天再分裂l次成为4细胞;到第3天时,好的胚胎应该是分裂了3次的8细胞,有时也会出现4~7细胞或大于8细胞的胚胎。如果这时候不移植胚胎,胚胎必须移到新鲜配制的胚胎培养液里继续培养约48~72小时。这时候,好的胚胎应该分裂了6次以上并形成囊胚。有的囊胚开始孵化或已完全从透明带中孵化出来,特别是第6天的胚胎。而不好的胚胎可能停留在某一阶段,只有囊胚可以用来移植,多余的囊胚可以冷冻保存,其他时期的胚胎可以认为已停止发育,一般情况下丢弃。
34、 8.胚胎移植(胚胎的第3—6天)理论上,胚胎在受精后的第l~6天的任何时期都可以移植。但是,为了选择质量更好的胚胎,大多数试管婴儿中心选择第3-6天胚胎来移植。此时依据患者的年龄,曾经怀孕与否及胚胎的质量,决定移植胚胎的数目。
35、胚胎移植是一个非常简单的程序,也是一个非常关键的程序,—般不需麻醉。手术时妇女处于仰卧姿势。医生用一个阴道扩张器暴露并清洗子宫颈,去掉子宫颈黏液后,检查子宫颈口的通畅状况。然后,实验室技术人员将挑选好的胚胎吸进一条移植导管,递给医生,医生将移植导管通过子宫颈送入子宫,把含有胚胎的液体注射到子宫腔内。在这个过程中可以移植一个或多个胚胎。整个移植操作仅需几分钟。
36、移植后息者休息约l个小时即可回家。在移植后的2-4天内尽量休息,因为这是胚胎着床的重要时期。目前大多数医生边使用超声仪观察边进行移植胚胎,这样医生可以准确地掌握胚胎的移植位置,怀孕率也会明显的提高。
37、 9.黄体的支持和妊娠检查(胚胎移植后14天)取卵后的第2~3天,或胚胎移植的前l天(第3天的胚胎移值)或前2-3天(囊胚移植)应该给患者使用孕酮来支持黄体。孕酮可以是口服的、阴道内给予的或是肌肉内注射的。孕酮的服用应持续到怀孕的诊断。如果没有怀孕,即刻停止使用,如果怀孕了则继续使用直到怀孕10周左右。有时黄体的支持还需要在胚胎移植后的几天内给予1或2次的绒毛促性腺激素,以补充体内过低的绒毛促性腺激素水平。
38、胚胎移植后第14天,胎儿体积仍然很小,无法在超声波仪器下看清,很难判断是否怀孕。但是由于胚胎着床后将分泌大量的绒毛促性腺激素,这些激素会进入血液,并会进入尿液,因此,可通过验尿或验血来确定绒毛促性腺激素的含量,从而判断是否怀孕。怀孕检查可能在14天后重复几次以便确诊。
39、 10.胎儿检查(胚胎移植后4~6周)妊娠4—6周后,胎儿体积在超声波仪器下清晰可见,因此可以通过超声波仪器进一步来判断怀孕情况,并且还可以观察胎儿的数目。超声波仪器下可见胎儿的发育、心脏的跳动和胎儿的活动情况。因此,怀孕后需要定时到产科医生那里做检查直到胎儿分娩。
40、生产试管婴儿日程表当夫妇决定用试管婴儿的技术治疗不孕时,从用药的第一天到胚胎移植14天后的怀孕检查,对于不孕夫妇来说是一个非常关键的时期。每天的生活和工作必须要配合医生所安排的检查、打针。不论你的工作有多么忙,既然已经决定了要接受试管婴儿的方案,患者就应该以治疗作为此段时间的重点。其实,如果安排好你的日程,既不耽误你的工作,也能保证最好的配合治疗。应当引以为戒的是,也许一个小的失误,会使你的这一治疗周期被取消。因此,细致的安排是相当重要的。
三、试管婴儿胚胎植入过程
试管婴儿胚胎移植的过程最终目的:把发育健康的胚胎移植到母体的子宫里,这一过程虽然简单,但是却十分重要。它需要患者以及所有医务人员的配合才能完成。下面我们具体介绍下这项试管婴儿胚胎植入过程。
1.移植时间的选择:在正常的生理情况下,胚胎将在排卵后4–5天发育成桑葚胚至囊胚阶段时进入子宫。
2.胚胎移植的数目:现根据卫生部的规定35岁以下第一周期的病人移植2个胚胎,其余病人移植3个胚胎
l)在胚胎移植皿(Falcon 3037)中加入lml新鲜的已CO2:平衡的培养液;
2)胚胎移植皿在培养箱内再平衡至少二十分钟后,在解剖镜下将挑选的胚胎转移人ET皿中,然后将ET皿放回培养箱等待移植;
3)将胚胎移植管接上lml注射器,打出注射器内的气体,接口不能漏气;
4)用注射器反复吸取和打出新鲜的已C02,平衡的培养液约lml,以排出气泡和润滑管腔,必须保证管腔的通畅、无阻力;
5)回吸约10u1的液体,再吸约lcm的气体;
6)从培养箱中取出胚胎移植皿,将胚胎移植管放在阔别胚胎的地方先吸取少许液体以打破液面的张力,然后再将全部胚胎吸入胚胎移植管内,吸取的液体量应控制在lcm的胚胎移植管的量;
7)胚胎移植管口离开液面后再依次吸取lcm的气体和液体;
8)再次核对病人姓名后将装有胚胎的胚胎移植管交给医生进行移植;
9)移植后取回胚胎移植管,回吸液体再将液体全部打出,并观察是否有胚胎残留。假如有胚胎残留须再进行移植。
很多朋友都在问,试管婴儿移植后着床有什么感觉。之所以会有这样的问题,是因为大家想通过这样感觉来判断自己是否顺利着床。其实不然,试管婴儿移植后着床大家的感觉和反应都是不一样的,医学界上也没并没有一个标准来判断是顺利着床了。因此,大家不要以为自己有感觉就是着床了,没有感觉就是着床不成功。
由于各自体质和所处环境不同,有些朋友在着床后会有像针刺的感觉,有些朋友甚至是直接就有了类似妊娠的反应,且反应剧烈,而有些人毫无感觉。所以说,试管婴儿移植后着床有什么感觉这个问题的答案是因人而异的。想要通过这样的方式来判断自己是否已经着床也是不科学的。
如果大家想要知道自己是否着床成功,建议大家在半个月左右的时间后去医院进行检测,这是最准确的方法。如在着床期间有任何反应和感觉,也切忌大惊小怪。整个时期一定要以平常心对待。也提醒各位朋友,不要轻易相信网上的着床偏方,一定要按照医生的嘱咐合理饮食。如出现了不良反应,请及时就医检查。
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