很高兴、小编今天能够为大家分享试管婴儿的胚胎怎么检查与怎么样看试管婴儿胚胎的相关内容,希望能够对大家有所帮助,如果您的问题得到解决,不要忘了收藏本站哟!
一、试管婴儿怎么培养胚胎
试管婴儿怎么培养胚胎,不孕不育并不可怕,试管婴儿是许多不孕夫妇的最后选择,试管婴儿需要通过检查排卵、取卵取精。试管婴儿的好处还有很多。以下分享试管婴儿怎么培养胚胎。
胚胎培养是指人类配子以及接受体外受精治疗的胚胎培养,卵子和精子结合后,会把受精卵放在装有营养液的培养皿里,培养3-6天,让他从一个细胞分裂多个细胞,最后发育成胚胎或囊胚。
医生获得卵子后会争分夺秒的把卵子送入实验室,一般取卵手术室和实验室是相连的,最大程度缩短卵子在体外暴露的时间。培养师拿到卵子后第一时间做处理,拨开卵子周围的颗粒膜细胞,展现卵子真正的面容。
培养师会对卵子进行评级:成熟卵、未成熟卵、变异卵。只有成熟的卵是可用卵。一般超促排的方法获得成熟卵能够达到80%的概率,就是属于正常情况。
卵子准备的同时,另一边会看精子情况。培养师会先进行观察,如果蝌蚪们一个个生龙活虎,那我们就不用为之后的结合而操心。主要通过多精子自由和卵子结合,或通过单精子注射结合,形成受精卵,再让发育成胚胎。
精子和卵子完成结合后,会把受精卵放在装有营养液的培养皿里,让他从一个细胞分裂多个细胞。
第一天:从1个细胞分裂成2个细胞
第四天:胚胎往往就挤在一起成为了一个大球,这个叫融合状胚胎
由于自月经周期的长短因人而异,同一患者不同周期也存在差异,所以不易安排取卵时间,而且自然周期中只有一个优势卵泡发育,受精后只能形成一个胚胎,而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。
所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能,以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的,提供多个胚胎移植,并尽可能使黄体发育与子宫内膜功能同步。
控制性超排卵一般是先用GnRHa使体内FSH和LH降调,再施与HMG或FSH排卵药物,刺激卵巢中的卵泡成长,依据患者对药物的反应性调整药物使用剂量,患者的年龄及药物的使用剂量不同,所获得的卵子数亦不同。
为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间,须利用阴道B超来监测卵泡大小,并配合抽血检查E2值(雌激素),调整用药量。当二至三个以上的卵泡直径大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当,便可注射人绒毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟。在注射hCG后34-36小时取卵。
最常用的取卵方式是在的局部麻醉下,经阴道B超引导,将取卵针穿过阴道穹窿,直达卵巢吸取卵子,并立即在显微镜下将卵子移到含胚胎培养液的培养皿中,置37°C的培养箱中培养。
精子取出的时间与取卵的日子为同一天。取精前洗净双手,用【自】慰法留取精液。所给的小杯是无菌的,留取时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。
取卵后4-5小时将处理后的精子与卵子放在同一个培养皿中,共同培养18小时后,可在显微镜下观察受精情况。若精子质量太差,无法自然受精,则必须以显微注射法强迫受精(参考卵细胞浆内单精子显微授精)。
受精卵在体外培养48-72小时可发育到8-16细胞期胚胎。此时依据患者的年龄、曾经怀孕与否及胚胎的质量,决定移植胚胎的数目,多余的胚胎可冷冻保存。
胚胎移植一般不需麻醉。目前多在受精后2-3天移植胚胎,我所采用的是受精后3-5天胚胎移植。推迟胚胎移植的时间,对体外培养的条件要求就越高,但推迟移植时间更符合妊娠生理,同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎,可提高妊娠率,降低多胎率。
目前我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。如果确定妊娠,则改用hCG继续补充到怀孕10周。
胚胎移植后14天,可由验尿或抽血确定是否妊娠。
1、卵子的质量精子的质量。实验室的环境。胚胎师的专业度。
2、而且培养的囊胚本来也不是一件容易的`事,对实验室的要求很高,实验室的氧气量,温度的变化都会影响最后的结果。而且精子和卵子的质量不好的话,胚胎也容易停止生长。
3、卵泡个数少,胚胎质量一般的建议不要养囊,养囊对胚胎质量要求比较高,一般胚胎移植是在取卵后第三天进行,这个时候的胚胎含有5~8个细胞,而囊胚是指胚胎在体外培育5~6天,达到数百个细胞,这个时候植入女方子宫就叫做囊胚移植。
养囊也叫囊胚培养,是“囊胚是胚胎体外培养”的终末阶段,它通常形成于卵子受精后的第5-7天。自然状态下,人类胚胎以囊胚的形式植入母体。进行囊胚移植,能获得较高的胚胎植入率。因此,进行囊胚培养、囊胚移植,始终是医患双方都感兴趣的一个选择。
胚胎培养实验室更是精密仪器成堆的神秘场所,是人类科技的巅峰体现之一。但实际上,自然状态下,母体提供了胚胎免光照、恒温、恒气体分压(最符合胚胎需要的二氧化碳、氧、氮分压)、最合理配比的营养物质及至关重要的必要细胞因子(并且所有这些物质保持动态更新、不存在代谢废物过度堆积)等条件。这些条件在实验室里,不是仅能粗略模拟,就是完全做不到。
二、怎么样看试管婴儿胚胎
每个做试管婴儿的人都会经历术前检查、促排卵、取卵(取精)等一系列过程,取完卵后在家焦急地等待3天后的结果,那这3天,精子和卵子又经历了什么?过了3天拿到了实验室结局告知单,急切地想知道我的胚胎发育好不好,是几级胚胎哈?是不是优质胚胎?普通胚胎和优质胚胎怎么看,有什么区别?其他人都有冷冻,为什么我的要养囊?,这篇文章将一一为你解答。
我们的工作流程是这样的:上午女方取卵,男方取精。我们把这一天定义成第0天,记做Day 0
女方取卵,穿刺取出来的其实是卵泡液,卵子就生活在卵泡液中。卵泡液经过卵子操作平台,实验室工作人员在显微镜下,从血淋淋的卵泡液中用细管吸出卵子,用干净的培养液洗涤2次,把卵子边上的血性液体洗掉,然后放置在培养液中,放入培养箱内,等待和精子受精。
(图中显示显微镜下看到的卵子,是不是和你想象中差异很大哈)
女方取卵的同时,男方取精。取出的精液放置在室温下半个小时至1个小时,待精液液化后,进入洗精操作平台,精子经过洗涤后,那些活力差的精子会被淘汰掉,留下来的基本上都是活蹦乱跳的好精子。
(洗好的精子先放在这样的管子里)
如果洗涤后,活动精子数量够多,一般考虑做第一代试管婴儿(精子自己钻进卵子内完成受精);
(第一代试管婴儿,精子围绕在卵子周围)
如果洗涤后,精子数量很少,一般考虑做第二代试管婴儿(将精子直接注射入卵子内完成受精)。
(第二代试管婴儿,将金子注射入卵子内)
如果前次做的是第二代试管婴儿,那么一般本次也默认做第二代试管婴儿。
这个授精方式的选择,并不像买家电、买手机,第二代就一定比第一代来的好。具体做第一代还是第二代,临床医生、实验室医生会根据你的具体情况决定,选最适合你的。
下午一点半左右开始授精。如果你是做第一代试管婴儿,实验室工作人员会把洗好的精子,按照每个卵子加1万个左右精子的比例,将精子加入到卵子周围,让精子自己钻入卵子内,完成受精。(根据每个中心的经验,加入精子个数会有所差异)。如果你是做第二代试管婴儿,实验室工作人员会挑选与卵子相对应个数的的精子,将精子一对一地注射入卵子内,使其完成受精。
取卵后的第一天(Day 1),观察受精情况。实验室工作人员会在显微镜下观察每个卵子的受精情况。当然,这个就像一场考试,也是几家欢乐几家愁。有些人全部受精了,有些人部分受精了,也有情况很糟糕的一个都没有受精。至于受不受精,完全取决于卵子和精子质量。
实验室工作人员怎么样评价精子卵子有没有受精呐?原核,实验室工作人员根据原核的有无来判断是非受精。
(箭头所指示的两个圆圈即为原核)
正常受精可以看到两个原核,记录为“2PN”。异常受精或没有受精,可以见到以下情况:0PN,1PN,3PN,4PN……。至于怎么出现这些异常受精的,我们下次再说。
观察完后,将胚胎放入新的培养皿中,换上新的培养液。这一天受精卵会分裂成2个细胞
第二天继续培养,这一天受精卵会分裂成4个细胞。
取卵后第3天(Day 3)早上,观察胚胎质量。激动人心的时刻到了,到了揭晓成绩的时候啦。
第3天,一般会分裂成8个细胞,但有的细胞分裂地快一点,有的细胞分裂地慢一点,一般6-12细胞都是正常的。光从个数无法说明胚胎质量。我们还会观察胚胎的外观和碎片率,对胚胎进行分级(以下内容了解即可):
Different stages of scoring a day 3 embryo-evaluating the number of cells, amount of fragmentation and symmetry of the cells(blastomeres)
(Bączkowski et al., Reproductive Biology, volume 4 No. 1, pgs. 5-22)
1级:胚胎卵裂球大小均匀,形态规则,透明带完整,胞质均匀、清晰,胚胎内碎片<10%;
2级:胚胎卵裂球大小略不均匀,形态略规则,胞质可有颗粒现象,碎片10%-20%;
3级:胚胎卵裂球大小明显不均匀,可有明显的形态不规则,胞质可有明显颗粒现象,碎片21%-50%;
4级:不可用胚胎,细胞大小严重不均匀,胞质可有严重颗粒现象,碎片超过50%。
Embryo picture of a"perfect" looking 8-cell embryo(day 3 embryo)
There is no embryo fragmentation and the cells are very even, regular, and similarly sizedWe call this is a"high quality" day 3 embryo(author Richard Sherbahn MD)
细胞数6-12个,碎片率20%以内,评级1-2级,可称为优质胚胎。我们中心记录方式为:细胞数—碎片率—评级,例如:8-5%-2,即8细胞,5%碎片率,2级。优胚就像优等生,有较高的怀孕成功率。但要说明的是,其他普通胚胎也是可以怀孕的。
胚胎比较多的,一般会把它们冷冻,等以后解冻使用。一般前2管,每管会放1-2个优质胚胎,第3管开始一般会多放几个胚胎。
F1:①6-1②8-2 F2:①8-15%-2②10-15%-2
以上代表您一共冷冻有4管胚胎,分别用F1、F2、F3、F4来区分,第一管F1里面有2个胚胎,分别是6细胞,1级;8细胞,2级;第2管F2里面有2个胚胎,分别是8细胞,15%碎片率,2级;10细胞,15%碎片率,2级;F3有5个胚胎,F4有3个胚胎。
如果身体条件很好,体内激素水平恢复正常,子宫内膜条件适合移植,则在这一天行鲜胚移植,根据情况,会挑选1-2个胚胎进行移植。
(B超阴道下,将胚胎注射入子宫)
多数人取卵后身体尚未恢复,体内激素水平一般比较紊乱,所以不行胚胎移植,将所有可用胚胎冷冻。
如您的胚胎较多,建议冻存2管左右的优质胚胎,其余胚胎养囊处理。什么是养囊?就是让胚胎在实验室培养液内再生长2-3天,看看有没有发育潜能,发育潜能好的,能够继续发育成囊胚;发育潜能差的,一般就无法存活。这是一个优胜劣汰的过程,模拟了体内生长过程,减少冷冻管数及费用,同时减少移植失败的次数。
如果您的胚胎质量比较一般,但经过评估后丢弃又可惜了,也建议养囊。有发育潜能的就能够继续存活下来,然后行囊胚移植,囊胚移植更接近人体正常的种植过程。
当然,养囊会损失一部分胚胎,这个您需要有心理准备,但一般来说养囊不成的胚胎,移植到体内受孕概率也是很低的。
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三、第三代试管婴儿 – 胚胎着床前染色体检查
PGS/ PGT-A,胚胎着床前染色体检查,或称胚胎着床前染色体整倍体检查,也就是一般俗称第三代试管婴儿。这个技术是借由植入前检查胚胎染色体是否正常,来提高胚胎植入后的怀孕率、或是来降低胚胎植入后的流产机会,来达成早日怀孕的目标。
这篇文章就来跟大家说明,PGS/ PGT-A的好处、限制,以及要注意的地方。
PGS:Pre-implantation(着床前) Geic(基因)Screening(筛检),现在又称PGT-A:Preimplantation(着床前) Geic(基因)Testing(检查)for Aneulploidy(非整倍体)。是借由现代生物科技技术,在胚胎着床前检查胚胎的染色体是否正常,来降低试管婴儿流产的机会,进而提高试管婴儿植入后的怀孕率。
高龄、重复性试管失败、染色体异常夫妻,建议接受PGS。
随着女性年纪增长,卵子品质会开始下降。超过34岁就认为是高龄,而超过38岁试管的成功率就会开始急速下滑,如果超过40岁就会更加困难。
根据统计,女性卵子染色体异常机会与年龄是正相关。20岁女性每20颗卵子才有一个卵子含有正常染色体,30岁女性则是每30颗卵子才有一个卵子有正常染色体,而40岁女性就需要40颗卵子才有一个卵子正常。
因此,高龄女性接受试管婴儿疗程,可以考虑PGS优先剔除染色体不正常的胚胎,来降低胚胎植入着床后的流产率,并且提高单一次胚胎植入成功的机会。
一般来说,一次试管的怀孕率大约50%~60%,因此如果接受试管胚胎植入三次应该有80%~ 90%的怀孕率。如果胚胎植入三次,都没有胚胎着床成功,除了进一步检查之外,应该考虑胚胎染色体是否不正常的比例偏高,所以应该就由PGS来找出正常胚胎,来提高胚胎着床的机会。
一般正常人细胞内有23对(总共46条)染色体,男生是46XY,女生是46XX。
人体在制造卵子跟***的过程中,染色体会进行减数分裂(也就是从46条,减少成23条)。各自带有23条染色体的卵子与***,结合受精之后,就会形成有46条染色体的胚胎,最后着床、发育、生产,就是一个正常的宝宝。
然而,在精卵制造的过程中,会有染色体分裂出错的状况,因而形成带有不正常染色体的卵子与***。这种不正常的精卵结合后,就会发育成不正常的胚胎。多数不正常的胚胎会自然淘汰(也就是不会着床)、或是会自然流产(着床后无法发育),少数不正常的胚胎会存活而生下染色体异常的宝宝,最常见的就是唐氏症。
而少部分夫妻,因为自身染色体有异常(可能是染色体微小片段缺失、可能是染色体反转、可能是染色体镶嵌型,但是不影响自身成长发育)。但是在精卵制造的过程中,无法自行修复,因此所产生的***跟卵子有染色体异常的比例就很高,而精卵结合之后形成的胚胎也有异常。这样的胚胎,无法正常着床、无法正常发育,几乎百分之百会流产。
因此,PGS可以预先知道这些异常的胚胎,进而降低胚胎植入后流产的机会。
传统试管婴儿的结果跟自然怀孕的过程也是相同。打针排卵***的卵子品质、跟先生取精的***品质,其实跟一般状况是雷同的。根据统计,传统试管婴儿的植入的胚胎中,即便是外观品质最好的第五天5AA囊胚,植入后也有15%~ 20%的流产率。
流产的原因前面有提到,就是制造***跟卵子的过程中,出现了问题,因此虽然外观上看起来品质最好,但是胚胎内部的染色体是异常的,异常的胚胎流产的机会大大的提高。(当然,外观越好的胚胎,染色体正常的比例越高。外观越差的胚胎,染色体正常的比例越低。)
所以我们发现,传统试管疗程,随着年纪越高,胚胎着床率越低、流产的机会也是越高。
但是,随着生物科技的发展,NGS(次世代染色体分析技术)的发明,配合胚胎切片及胚胎染色体检查,我们可以借由植入染色体正常的胚胎,来降低胚胎植入着床后的流产机会、也可以提高每次植入的怀孕率、也可以提高每次植入的活产率。
我们来详细比较「传统试管」跟「PGS胚胎着床前染色体检查(第三代试管婴儿)」的差异。
传统试管,单一周期植入两个胚胎(第五天好囊胚)的怀孕率大约50%~ 60%,胚胎植入着床后的流产率大约15%,费用就是一般试管婴儿费用,而从开始取卵到验孕的时间大约一个月。
第三代试管婴儿,胚胎植入周期植入一个胚胎的怀孕率有50%,胚胎植入着床后的怀孕率小于5%,整体的费用(包含打针、取卵、养胚、切片、染色体检查、胚胎解冻植入等)大约可以做三次传统试管婴儿,时间最少需要三个月。
可以看到,第三代试管跟传统比较,有高怀孕率、低流产率的优点,但是高费用、需时间长就是受到比较多限制的地方。
再次复习一下:胚胎植入前染色体检查PGS,植入染色体正常的胚胎,单一胚胎的怀孕率有50%,流产率小于5%。 PGS的步骤
上面提到,PGS从开始到胚胎植入验孕需要三个月,我们来看看PGS的步骤有哪些。
PGS的步骤简单可以分为三部分,每个步骤也可以分为三个细节,现在就来仔细了解一下。
步骤3.:建立内膜、解冻胚胎植入
这个阶段就是为了要培养胚胎,也跟传统试管婴儿胚胎植入前的步骤雷同。
步骤1.1:MC第二天开始打针,排卵***。
跟传统试管一样,MC见红的第二天或是第三天开始接受排卵***,时间到注射破卵针***卵子成熟。就可以皆下一步。
跟传统试管相同,接受静脉全身麻醉、不用插管,接受取卵手术。取卵时间大约30分钟,前面准备需时30分钟,后面术后麻醉恢复需时一小时。取卵节术后,卵子就会交给胚胎技术师,开始后续胚胎培养的过程。
接受PGS的疗程,精卵结合(也就是卵子授精)的方式是用ICSI(单一精虫显微注射),而非传统精卵自然结合(Insemination)。使用ICSI可以避免额外***的染色体影响后续染色体检查的正确性。受精后的卵子就开始进入胚胎培养。
这个步骤是PGS最复杂的地方。养到第五天、第六天的胚胎,经过一连串的处理,准备接受检查。
步骤2.1:胚胎培养到第五天、第六天
过去PGS的胚胎切片,多是取第三天的胚胎做胚胎切片。但是,近年国际文献发现,第五天、第六天囊胚切片结果更为准确。因此,近年PGS国际标准建议是:第五天、第六天囊胚(Day 5、Day 6 Blastocyst)接受切片检查。
选定胚胎之后,胚胎需要接受雷射打薄人工协助孵化(AH,Laser Assisted Artificial Hatching)。雷射打薄是将胚胎的外壳用精准雷射光打一个小洞,让部分胚胎细胞能够膨出,到胚胎壳之外,方便皆下来做胚胎切片。
培养到第五天的胚胎,部分的胚胎细胞膨出到壳外之后,胚胎师就会用胚胎切片的技术,摘取五个~六个囊胚外圈细胞(滋养层细胞),这个技术也称为滋养层切片(Trophectoderm Biopsy)。摘下来的细胞会装在PGS专门用的染色体分析试管,准备接受染色体分析。
细胞样本则利用NGS的方式做染色体分析。NGS是次世代染色体分析,利用人体染色体基因库中相同的片段,做电脑分析计算后,分析胚胎染色体正常与否。NGS这种新方式,较传统FISH等方式,准确度较高、但费用也较高,但也是现今国际检查的标准方式。
所以,PGS结合 NGS才会是比较正确的作法。
切片后的胚胎,会被玻璃化冷冻在零下198度的液态氮桶里,静待染色体检查的结果。玻璃化冷冻的胚胎,有99.9%以上的解冻存活率,是现在冷冻胚胎的唯一标准。胚胎保存在液态氮桶里,环境稳定,可以保存十年没有问题。
染色体分析完成后,如果有染色体正常的胚胎,就可以开始第三步骤:解冻非胎植入。这个步骤跟传统试管解冻胚胎周期类似。
步骤3.1:MC第二天开始口服药物建立内膜
服用雌激素、模拟正常生理荷尔蒙、使内膜逐渐增厚。(这个时期禁用黄体素,会失败、会失败。千万不要相信网路谣言:黄体素可以帮助胚胎着床,所以提早使用黄体素。这个时期使用黄体素,只会让内膜因为提早黄体化而无法让胚胎着床。)
这个时候才能开始使用黄体素。一般使用雌激素让内膜长到0.8公分以上,就可以计算时间,开始使用黄体素
使用黄体素五天之后,就可以准备解冻胚胎植入。胚胎植入后两个星期,就可以验孕。
再来,简单的分享临床经验。一个PGS周期大约有多少正常胚胎,年纪如果小于38岁,一次取卵周期如果有12个卵子,受精后大约有10个受精卵,第五天大约可以有3~5个囊胚可以切片,切片后大约有2~3个正常胚胎。
但是,如果是有夫妻染色体异常、年纪超过38岁、或是少于12颗卵子,可能就不会有那么多染色体正常的胚胎。
所以,在有打算PGS的夫妻,需要在疗程前接受一对一专业咨询,才能够精准的分析评估。
PGS(第三代试管婴儿)合并NGS可以提高单一胚胎植入后怀孕率,降低胚胎植入着床后流产机会。如果是高龄、有重复试管失败经验、或是有夫妻染色体异常的问题,建议使用PGS来提高试管成功机会。
试管婴儿的胚胎怎么检查的介绍就聊到这里吧,感谢你花时间阅读本站内容,更多关于怎么样看试管婴儿胚胎、试管婴儿的胚胎怎么检查的信息别忘了在本站进行查找哦。